提取银杀真菌的方法有多种,以下是其中一种常见的方法:
材料:
含有银离子的溶液(如硝酸银溶液)
真菌样品
玻璃棒、滤纸等实验器材
步骤:
1、准备含有银离子的溶液,将硝酸银溶解在水中,制成浓度为0.1-0.5mol/L的溶液,注意:硝酸银是一种有毒物质,操作时需戴手套和护目镜,并保持通风良好。
2、取一定量的真菌样品,加入含有银离子的溶液中,使其充分浸泡,通常建议将真菌样品与溶液按质量比为1:10的比例混合。
3、在室温下静置一段时间,让银离子与真菌中的DNA结合形成沉淀,时间长短视具体情况而定,一般需要数小时至一天左右。
4、用玻璃棒轻轻搅拌混合物,使沉淀物均匀分散在溶液中,然后通过滤纸过滤掉固体颗粒,得到含有银离子的液体。
5、将含有银离子的液体转移到干净的容器中,加入适量的无水乙醇或异丙醇,使银离子沉淀下来,通常建议将溶液与乙醇按体积比为1:3的比例混合。
6、在室温下静置一段时间,让银离子与乙醇形成沉淀,时间长短视具体情况而定,一般需要数小时至一天左右。
7、用玻璃棒轻轻搅拌混合物,使沉淀物均匀分散在溶液中,然后通过滤纸过滤掉固体颗粒,得到含有银离子的液体。
8、将含有银离子的液体转移到干净的容器中,加入适量的蒸馏水稀释至适当浓度即可使用,需要注意的是,在使用前应先进行灭菌处理,以避免细菌污染。
提取银杀真菌的方法通常涉及使用有机溶剂或其它化学物质来分离和纯化真菌中的银杀活性成分,下面是一个简化的介绍,概述了提取银杀真菌的一般步骤和所需材料。
步骤 | 材料 | 操作方法 |
1. 收集真菌 | 银杀真菌菌株 | 从自然来源或培养皿中收集真菌样本 |
2. 准备真菌材料 | 将真菌材料干燥并粉碎,以便于提取 | |
3. 固相萃取 | – 无水硫酸钠(干燥剂) – 硅藻土(吸附剂) |
将粉碎的真菌材料与固相萃取材料混合,用于吸附真菌中的银杀成分 |
4. 有机溶剂提取 | – 丙酮/甲醇混合溶剂(70:30)或其他适合的有机溶剂 | 将混合溶剂加入真菌和固相萃取材料的混合物中,进行搅拌或振荡提取 |
5. 过滤 | 滤纸或漏斗 | 将提取液过滤,收集滤液 |
6. 减压浓缩 | 真空旋转蒸发器 | 使用旋转蒸发器去除溶剂,得到浓缩的银杀提取物 |
7. 纯化 | – 柱层析填充料(如硅胶) – 不同极性的洗脱剂 |
通过柱层析进一步纯化提取物,根据活性成分的极性选择合适的洗脱剂 |
8. 检测活性 | �银杀活性检测方法(如琼脂扩散法) | 使用特定的检测方法评估纯化后提取物的银杀活性 |
9. 收集纯品 | – 丙酮/己烷等溶剂 | 收集具有银杀活性的组分,并通过溶剂交换或冷冻干燥得到纯品 |
10. 储存 | 干燥、避光、冷藏条件 | 在适当的条件下储存纯化的银杀真菌提取物 |
请注意,这个介绍是一个简化的过程,实际操作中可能需要根据真菌种类、提取物的性质以及实验室的具体条件进行调整,安全操作规程和适当的个人防护装备也应在使用有机溶剂时严格遵守。
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